生态系统国家野外站历史数据整编专题 II 区论文(已发表) 版本 ZH3 Vol 8 (4) 2023
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2016–2021年海南文昌菜地土壤微生物数据集
A dataset of soil microorganisms for vegetable fields in Wenchang City of Hainan from 2016 to 2021
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: 2023 - 02 - 08
: 2023 - 07 - 18
: 2023 - 04 - 20
: 2023 - 08 - 24
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5009 16 0
摘要&关键词
摘要:随着热带特色高效农业的快速发展,种植结构变化加快,新的耕作管理模式对菜地生态系统影响的不确定性增加。土壤微生物在维持土壤功能方面起重要作用,是表征土壤质量的重要指标。因此监测热带地区菜地种植制度下微生物群落组成和功能及代谢,对于探究微生物群落演替及其驱动因子和养分循环等微观机理尤为重要。本数据集基于土壤微生物DNA/RNA分子生物学技术,整合了2016–2021年海南儋州热带农业生态系统国家野外科学观测研究站文昌观测场菜地单施化肥、秸秆还田、化肥+秸秆还田三种模式下土壤细菌和真菌的扩增子高通量测序数据,样地的设置、观测和维护、样品的采集、样品制备与保存、数据填报和质控严格按照中国生态研究网络(CERN)统一规范执行。本数据集对于研究热带地区菜地生态系统养分循环、分析环境要素与生产系统间的相互作用机理、调整作物耕作管理方式和养分投入、提高热带农业生态系统服务功能等具有重要实际意义。
关键词:热带地区;2016–2021年;菜地生态系统;扩增子高通量测序;细菌;真菌
Abstract & Keywords
Abstract: With the rapid development of tropical-specific and efficient agriculture coupled with changes in planting structures, the uncertainty regarding the implications of new farming management patterns on vegetable ecosystems has heightened. As important indicators for assessing soil quality, soil microorganisms play a crucial role in maintaining soil function. Therefore, monitoring microbial community composition and function and metabolism under the cropping system in tropical region is particularly important for investigating microbial community successions and their driving factors and unraveling intricate processes like nutrient cycling and other microscopic mechanisms.. Based on soil microbial DNA/RNA molecular biology techniques, this dataset was integrated with high-throughput sequencing data of soil bacteria and fungi under three fertilization patterns: chemical fertilizer alone, straw return, and chemical fertilizer + straw return in vegetable fields in Wenchang City, Hainan Province during 2016-2021. The processes of site setting, observation and maintenance, sample collection, sample preparation and preservation, data filling and quality control are strictly implemented in accordance with the unified standards of China Ecological Research Network (CERN). The dataset is of great significance for studying the nutrient cycling of vegetable ecosystems in tropical regions, analyzing the interaction mechanism between environmental elements and production systems, adjusting crop cultivation management methods and nutrient inputs, and improving the service functions of tropical agroecosystems.
Keywords: tropical region; 2016–2021; vegetable field ecosystem; amplicon high-throughput sequencing; bacteria; fungi
数据库(集)基本信息简介
数据库(集)名称2016–2021年海南文昌菜地土壤微生物数据集
数据通信作者李勤奋(qinfenli2005@163.com)
数据作者陈淼、李勤奋
数据时间范围2016–2021年
地理区域海南儋州热带农业生态系统国家野外科学观测站文昌观测场(中心点经纬度:110.46°E,19.32°N)
数据量8.03 GB
数据格式.fq, *.xlsx
数据服务系统网址http://dx.doi.org/10.57760/sciencedb.ecodb.00093
基金项目国家科技基础资源调查专项资助(2021FY100703);海南省重大科技计划项目(ZDKJ2021008);国家自然科学基金(42007098);农业农村部科技教育司政府购买服务项目(13200212、13210103、13220022)。
数据库(集)组成数据集包含1个文件夹和3个EXCEL数据表:“原始测序数据”文件夹包括2016–2021年文昌站菜地土壤高通量扩增子测序细菌和真菌原始序列,198个FQ文件;“2016–2021年海南文昌菜地细菌”和“2016–2021年海南文昌菜地真菌”数据表分别记录细菌和真菌扩增子测序序列在97%相似度下聚类获得OTU丰度及对应物种分类信息;“数据质量控制统计”数据表记录细菌或真菌每年测序结果表单涉及各样本序列数目及数据评估。
Dataset Profile
TitleA dataset of soil microorganisms for vegetable fields in Wenchang City of Hainan from 2016 to 2021
Data corresponding authorLI Qinfen (qinfenli2005@163.com)
Data authorsCHEN Miao, LI Qinfen
Time range2016–2021
Geographical scopeWenchang Observation Site of Danzhou Tropical Agro-ecosystem of the National Observation and Research Station, Hainan (110.46°E, 19.32°N)
Data volume8.03 GB
Data format*.fq, *.xlsx
Data service systemhttp://dx.doi.org/10.57760/sciencedb.ecodb.00093
Sources of fundingThe Special Project on National Science and Technology Basic Resources Investigation of China (2021FY100703); Major Science and Technology Plan of Hainan Province (ZDKJ2021008); National Natural Science Foundation of China (42007098); Government Purchase Service Project of Department of Science, Technology and Education, Ministry of Agriculture and Rural Affairs (13200212, 13210103, 13220022).
Dataset compositionThe dataset consists of one folder and 3 EXCEL data tables: The "original sequencing data" folder includes the original sequences of bacteria and fungi for high-throughput amplicon sequencing in the vegetable soil of Wenchang Station from 2016 to 2021, and 198 FQ files; The data tables titled "2016-2021 Hainan Wenchang Vegetable Field Bacteria" and "2016-2021 Hainan Wenchang Vegetable Field Fungi" include the amplified sequences of bacteria and fungi respectively clustered using a 97% similarity threshold to derive the OTU abundance and the corresponding species classification details. The data sheet titled "Data Quality Control Statistics" records the annual sequencing results of bacteria or fungi.
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引 言
随着我国种植业的结构优化,蔬菜种植已成为继粮食作物之后的第二大农作物。研究表明我国菜地化肥用量约为农作物用量的3.3倍[1]。肥料合成效率的提高在提升作物产量的同时也引起了一系列环境问题,增加了农业生态系统的环境成本[2]。过量化肥使用引起的肥料利用率降低、面源污染、土壤微生物群落结构破坏等突出问题严重制约了我国蔬菜产业的可持续发展[3-5]。海南是我国主要的冬季瓜菜种植基地,随着热带特色高效农业的快速发展,种植结构变化加快,新的耕作管理模式不断涌现,对农田生态系统影响的不确定性增加。高温多雨的气候特点在加速土壤微生物对有机质的分解利用的同时也加剧土壤养分淋失。据调查,在海南蔬菜种植过程中,氮磷钾复合肥的投入量远高于作物养分需求量[6],导致土壤中氮素的流失和磷素的积累[7-8],影响土壤微生物的生长和繁殖[4]
土壤微生物是农田生态系统的重要组成成分,主要充当分解者的角色。土壤微生物通过不同微生物类群之间和类群内部之间相互作用参与有机物的分解转化和养分循环等,在维持土壤功能方面起重要作用[3, 9]。土壤微生物类群繁多、组成复杂、功能多样、且数量巨大,构成了地球上最复杂的生物资源库、基因资源库和代谢产物库[9]。微生物群落多样性、时空分布格局、重要养分循环等生态过程的介导已然受到微生物学、生态学、土壤学等领域学者的重视,成为当前研究的热点。近年来,随着基于土壤微生物DNA/RNA分子生物学技术的快速发展,测序技术的发展和研究日益深入,特别是土壤宏基因组学受到广泛关注。分子生物学技术是了解土壤微生物群落组成、功能、代谢、演变过程的重要手段,相关观测结果对探究微生物群落演替及其驱动因子、阐明养分循环等微观机理具有重要意义[10]。目前,已公开微生物数据集涉及农田生态系统土壤[11-12]、森林土壤[13-14]等,热带地区菜地土壤微生物长期动态监测仍属空白,因此,热带地区菜地土壤微生物组的长期动态监测具有重要现实意义。
本数据集汇集了海南省文昌市2016–2021年菜地土壤微生物扩增子测序数据,包含单施化肥、秸秆还田和单施化肥结合秸秆还田三种模式下细菌和真菌的测序数据,且以数据论文形式对数据进行系统描述,以推动数据共享和规范化使用。
1   数据采集和处理方法
1.1   观测样地设置
海南儋州热带农业生态系统国家野外科学观测站文昌观测场(中心点经纬度:110.46°E,19.32°N)建设于2014年,土壤为海相沉积发育的砖红壤,土壤质地为沙壤土。耕作层土壤(0–20 cm)初始理化性质为:pH5.86,容重1.56 g/cm3,总氮0.15 g/kg,总磷0.13 g/kg,总钾0.80 g/kg,有机碳2.91 g/kg。每年5–10月为雨季,常年降雨量1721.6 mm。热带海洋季风气候,年均温度为23.9 ℃,年平均降水量1886 mm,极端天气为夏季暴雨春季干旱。
文昌观测场试验小区分布见图1,种植制度为南方湿润平原区露地蔬菜轮作模式[8],作物为辣椒(“湘辣十七号”)和豇豆(“泰国金龙长豆角”)。辣椒10月初播种,次年4月中旬收获;豇豆5月初播种,8月底收获。株行距为45 cm×50 cm,覆膜。试验小区为10 m×6.2 m平地,小区与保护行之间及小区之间以宽24 cm,高70 cm(地面以下深度60 cm)砖混结构的田埂分离。采用随机区组设计,设置3个处理:单施化肥(CF)、化肥+秸秆还田(FS)、秸秆还田(CS),每个处理重复3次。秸秆为玉米秸秆,秸秆还田处理使用旋耕灭茬使其均匀分布于耕层。施肥量见表1。


图1   海南儋州热带农业生态系统国家野外科学观测站文昌观测场
Figure 1 Wenchang Observation Site of Danzhou Tropical Agro-ecosystem National Observation and Research Station, Hainan Province
表1   试验施肥方案
处理基肥(kg/hm2追肥(kg/hm2
NP2O5K2O秸秆还田(ad)NP2O5K2O
CF200.52200.52200.52073.5939.9373.59
SF200.52200.52200.52161473.5939.9373.59
CS0001614000
1.2   样品采集与测试
于每年8月份作物收获后采集0–20 cm耕层土壤,去掉凋落物、碎石、根系等杂物,-80 ℃冷藏保存,委托百迈克生物科技有限公司(北京,中国)进行高通量扩增子测序,使用MN NucleoSpin 96 Soi试剂盒提取DNA,基于Illumina HiSeq平台,分别使用338F/806R引物对(5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3'/5'- GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3')对16S rDNA基因V3-V4区进行扩增,使用ITS1F/ITS2引物对(5'-CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA-3'/5'-GCTGCGTTCTTCATCGATGC-3')对DNA内转录间隔区利用双末端测序的方法完成。
1.3   数据处理
原始测序数据首先使用Trimmomatic(version 0.33)进行质量过滤,然后使用Cutadapt(version 1.9.1)进行引物序列的识别与去除,其后使用 USEARCH(version 10)软件(Edgar 2013)对双端reads进行拼接并去除嵌合体(UCHIME, version 8.1),16S rDNA最终得到633468条高质量的序列,ITS最终得到688172条高质量序列,在97%相似度水平下进行聚类,以测序所有序列数的 0.005%作为阈值过滤OTU分别与Silva和Unite数据库比对,使用RDPClassifier(version2.2)进行物种注释,置信度阈值为0.8,获得每个OTU的分类学注释。最后根据单个样本所包含序列数构建OTU矩阵文件。
2   数据样本描述
2.1   数据集命名规则及数据量
本数据集为海南儋州热带农业生态系统国家野外科学观测站文昌观测场(海南省文昌市)2016–2021年菜地土壤高通量扩增子测序细菌和真菌数据,大小为8.03 GB。文件名为“2016–2021年海南文昌菜地土壤微生物数据集”,含1个文件夹和3个EXCEL数据表,分别命名为“原始测序数据”“2016–2021年海南文昌菜地细菌”“2016–2021年海南文昌菜地真菌”和“数据质量控制统计”。
“原始测序数据”文件夹内含“2016–2021年细菌原始序列”和“2017–2021年真菌原始序列”两个文件夹,分别内含108和90个FQ文件,FQ文件为每个样本原始双端测序文件。FQ文件命名规则为“年份+处理编码”,如文件“2016-CF1_1.fq”和“2016-CF1_2.fq”为2016年单施化肥处理土壤样本1双端测序文件。
“2016–2021年海南文昌菜地细菌”和“2016–2021年海南文昌菜地真菌”数据表为扩增子测序结果,各包括6个表单,分别记录2016年至2021年,单施化肥(CF)、化肥+秸秆还田(FS)和秸秆还田(CS)三个处理的细菌或真菌扩增子测序序列在97%相似度下聚类获得OTU(操作单元)丰度及对应物种分类信息,每个表单以年份命名,如“2016”。
“数据质量控制统计”数据表为每次测序结果质量控制统计结果,内含2个表单,分别记录细菌或真菌每年测序结果表单涉及各样本序列数目及数据评估,命名为“细菌”和“真菌”。
2.2   数据样本描述
样本原始测序文件存储了该样本生物序列及相应质量评价,均以ASCII字符表示,是目前高通量测序结果的事实标准。FASTQ文件中每个序列通常有四行:第一行:以“@”开头,后面跟着唯一序列ID标识符和可选序列描述内容,二者用空格隔开;第二行:序列字符;第三行:以“+”开头,后面跟着可选ID标识符和描述内容,如果“+”后有内容则与第一行“@”后的内容相同;第四行:碱基质量字符,其字符数与第二行字符数相同,按一定规则转化为碱基质量得分,能够反映该碱基的错误率。“2016-CF1_1.fq”文件中部分序列信息如图2。


图2   “2016-CF1_1.fq”文件中部分序列信息
Figure 2 Part of the sequence information in the “2016-CF1_1. fq” file
表2列出“2016–2021年海南文昌菜地细菌”和“2016–2021年海南文昌菜地真菌”数据表中表头示例并详细记录表单数据项含义、数据类型等信息。
表2   细菌或真菌测序表单内容
序号字段名称数据类型数据项说明单位示例
1OTU ID字符型OTU信息-OTU1
2CF1数字型样本CF1中该OTU所含序列数356
3CF2数字型样本CF2中该OTU所含序列数86
4CF3数字型样本CF3中该OTU所含序列数12
5CS1数字型样本CS1中该OTU所含序列数72
6CS2数字型样本CS2中该OTU所含序列数292
7CS3数字型样本CS3中该OTU所含序列数783
8SF1数字型样本SF1中该OTU所含序列数83
9SF2数字型样本SF2中该OTU所含序列数37
10SF3数字型样本SF3中该OTU所含序列数615
11taxonomy字符型该OTU对应物种分类信息-k__Bacteria;
p__Actinobacteria;
c__Actinobacteria; o__Pseudonocardiales; f__Pseudonocardiaceae;
g__Crossiella; s__uncultured_bacterium_g_Crossiella
表3列出“数据质量控制统计”中表头示例,并详细记录表单数据项含义、数据类型等信息。
表3   数据质量控制统计表单内容
序号字段名称数据类型数据项说明单位示例
1Time字符型年份-2016
2Sample ID字符型样本名称-CF1
3PE Reads数字型双端序列数79137
4Raw Tags数字型原始序列数75795
5Effective Tags数字型有效序列数63178
6AvgLen (bp)数字型样本平均序列长度bp416
7GC (%)数字型G和C类型的碱基占总碱基的百分比%56.89
8Q20 (%)数字型质量值大于等于20的碱基占总碱基数的百分比%97.29
9Q30 (%)数字型质量值大于等于30的碱基占总碱基数的百分比%94.9
10Effective (%)数字型有效序列占原始序列的百分比%81.94
3   数据质量控制和评估
文昌观测场作为海南儋州热带农业生态系统国家野外科学观测站观测区之一,在国家野外科学观测研究站的统一规划和指导下,围绕热带农业绿色发展需要,系统开展热带农业生态系统水、土、气、生等要素的长期、连续、动态的定位监测和数据汇聚,形成了系统的观测指标、观测方法、和观测质量控制体系。文昌观测样地的设置、观测和维护、样品的采集、样品制备与保存、数据填报和质控规范根据《中国生态系统研究网络(CERN)长期观测规范》[15-18]执行。
本数据集所涉及的样本序列均经过数据处理和统计,包括过滤低质量、数据产出及质控统计。原始序列首先经过低质量过滤(Trimmomatic[19], version0.33),然后识别并去除引物序列(cutadapt,version1.9.1),进行拼接(Usearch,version1.2.11),拼接后去除嵌合体(UCHIME[20], version1.2.11),得到最终的高质量序列。最后统计各阶段的序列数,序列长度等参数对数据进行评估。
4   数据价值
本数据集整合了2016–2021年海南省文昌市菜地耕层土壤微生物细菌和真菌扩增子测序的数据,为了解热区菜地不同田间管理模式下土壤微生物组成,探究土壤微生物群落演替及其影响因子和养分循环微观机理提供数据基础,有助于分析环境要素与生产系统间的相互作用机理,具有重要的实际意义。
5   数据使用方法和建议
本数据集可通过科学数据银行(Science Data Bank)在线服务获得,如需本数据集的其他相关数据信息可咨询本文作者(chenm200567@163.com)。后续作者会陆续将台站长期观测包括与本文相关的其他数据内容撰写数据论文,以提供更好的数据共享服务。
致 谢
衷心感谢海南儋州热带农业生态系统国家野外科学观测研究站观测人员的支持!感谢中国农业科学院农业资源与农业区划研究所刘宏斌老师、翟丽梅老师在实验设计与数据质量控制方面给予的指导!感谢中国热带农业科学院环境与植物保护研究所范长华、葛梅红和冷有锋硕士在样品采集、数据收集与处理方面给予的帮助!
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数据引用格式
陈淼, 李勤奋. 2016–2021年热带地区菜地土壤微生物数据集[DS/OL]. Science Data Bank, 2023. (2023-06-06). DOI:10.57760/sciencedb.ecodb.00093.
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稿件与作者信息
论文引用格式
陈淼, 李勤奋. 2016–2021年热带地区菜地土壤微生物数据集[J/OL]. 中国科学数据, 2023, 8(4). (2023-08-24). DOI: 10.11922/11-6035.csd.2023.0077.zh.
陈淼
CHEN Miao
观测系统的长期连续运行、数据质量控制与整合。
(1985—),男,四川省绵阳市人,博士,副研究员,研究方向为土壤碳氮循环与农业面源污染控制。
李勤奋
LI Qinfen
观测系统的总体运行和数据集的整体架构。
qinfenli2005@163.com
(1974—),女,内蒙古自治区鄂尔多斯市人,博士,研究员,研究方向为农业资源与环境保护。
国家科技基础资源调查专项资助(2021FY100703);海南省重大科技计划项目(ZDKJ2021008);国家自然科学基金(42007098);农业农村部科技教育司政府购买服务项目(13200212、13210103、13220022)。
The Special Project on National Science and Technology Basic Resources Investigation of China (2021FY100703); Major Science and Technology Plan of Hainan Province (ZDKJ2021008); National Natural Science Foundation of China (42007098); Government Purchase Service Project of Department of Science, Technology and Education, Ministry of Agriculture and Rural Affairs (13200212, 13210103, 13220022).
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出版历史
I区发布时间:2023年4月20日 ( 版本ZH2
II区出版时间:2023年8月24日 ( 版本ZH3
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